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一种赛拉菌素+沙罗拉纳滴剂对欧洲猫自然感染的跳蚤蜱虫的有效性和安全性研究

2022-01-13 12964 返回列表

摘要

在欧洲（德国、意大利、法国、匈牙利）进行了两项随机、盲法、多中心实地研究，以证明连续三个月使用赛拉菌素+沙罗拉纳新滴剂配方对猫自然感染的跳蚤或蜱虫的有效性和安全性(Stronghold® Plus, 硕腾）。以每千克体重6.0–12.0 mg赛拉菌素和1.0–2.0 mg沙罗拉纳的剂量范围使用滴剂。在跳蚤研究中，还监测了与跳蚤过敏性皮炎 (FAD) 相关的临床症状的改善情况。吡虫啉+莫昔克丁（猫用Advocate® ，Bayer）和非泼罗尼（Frontline® 滴剂，Merial）分别用作跳蚤和蜱虫研究中的阳性对照产品。在第 0、30 和 60 天进行治疗。根据治疗后第 14、30、60 和90天与第0天治疗前活寄生虫计数的平均减少百分比计算疗效。在每个时间点，在单侧0.025显著性水平上使用15%的非劣效性边界，评估赛拉菌素/沙罗拉纳相对于对照产品的影响。猫以2:1的比例（赛拉菌素/沙罗拉纳：对照组）招募。

在针对跳蚤的研究中，有277只猫进行了有效性和安全性评估，另外有170只猫仅进行了安全性评估。在第14、30、60和90天，赛拉菌素/沙罗拉纳组对跳蚤的有效率分别为97.4%、97.3%、98.8%和99.4%，而吡虫啉/莫昔克丁组为90.0%、83.6%、87.7%和96.3%。赛拉菌素/沙罗拉纳组在所有时间点均不劣于吡虫啉/莫昔克丁。对于在登记时被确定患有 FAD 的16只猫，治疗后与FAD相关的临床症状得到改善。在对蜱虫研究中，有200只猫进行了有效性和安全性评估，另外70只猫仅进行了安全性评估。鉴定了四种蜱种。在第14、30、60和90天时，赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组对蜱的总体疗效分别为 96.7%、92.6%、98.8%和99.5%，而非泼罗尼治疗组的总体疗效分别为 90.2%、74.6%、83.0% 和93.4% 。赛拉菌素/沙罗拉纳在所有时间点均不劣于非泼罗尼，并且在第30天和第60天优于非泼罗尼。所有研究中均未出现严重的与治疗相关的不良事件。因此，赛拉菌素+沙罗拉纳的新滴剂每月给药一次，对猫跳蚤和蜱虫的自然感染是安全且高效的，并可改善FAD的临床症状。

1、前言

猫体内外寄生虫的治疗和/或预防是一般兽医临床的一个组成部分。家猫可能受到一系列寄生虫的困扰，所有寄生虫都能引起明显的临床症状。在欧洲最近的一项研究中，发现 50.7% 的猫至少患有一种体内或体外寄生虫，11.9% 的猫同时感染了外寄生虫和胃肠蠕虫（Beugnet 等，2014）。众所周知，猫栉首虱经常感染猫，据报道其流行率高达 70%（Beck 等，2006 年；Bond 等，2007 年；Farkas 等，2009 年；Capári 等，2013 年；Knaus 等，2014 年；Lefkaditis 等，2015 年）。美国每年用于控制伴侣动物跳蚤的支出超过 10 亿美元，西欧为 11 亿欧元（Krämer 和 Mencke，2001 年）。虽然猫的蜱感染报告比狗少，但最近的研究表明，欧盟发现感染猫的蜱种主要有四种（蓖子硬蜱、六角硬蜱、血红扇头蜱和网纹革蜱）（Ogden 等，2000；Otranto 和 Dantas-Torres，2010；Stanneck 等，2012；Capári 等，2013；Claerebout 等，2013；Pennisi 等，2015）。跳蚤和蜱虫都是致病性病原体如病原性原生动物（如巴贝虫属）、病毒（如蜱传脑炎病毒）、立克次体和细菌（如亨氏巴尔通体；伯氏疏螺旋体、埃立克体、土拉弗朗西斯氏菌、无形体属）的重要载体，且其中许多是人畜共患病。尽管猫并不总是直接受到影响，但杀螨或杀虫治疗对于控制这些媒介传播的病原体向更易感的宿主（包括人类）的传播很重要。

由于体内外寄生虫的流行率很高，因此需要安全有效的产品来治疗猫的这些寄生虫。赛拉菌素是一种广为人知的驱虫药，其对跳蚤、耳螨、虱子、心丝虫和胃肠道线虫有杀灭作用。沙罗拉纳是一种新型异噁唑啉类驱虫药，其对多种体外寄生虫具有强效活性（McTier 等, 2016）。在赛拉菌素+沙罗拉纳 (Stronghold® Plus) 新滴剂配方中，沙罗拉纳扩大了的功效范围，将蜱虫包括在其中。在实验室研究中，发现赛拉菌素+沙罗拉纳新滴剂配方对跳蚤和蜱虫非常有效（Becskei 等，2017；Geurden 等，2017）。在法国、意大利、匈牙利和德国进行了两项临床实地研究，以评估赛拉菌素+沙罗拉纳新滴剂配方对猫的自然感染的跳蚤和蜱虫的有效性和安全性。

2、材料和办法

在法国、匈牙利、意大利和德国的兽医诊所进行了两项随机、盲法、阳性对照临床研究，这些研究招募了患有跳蚤或蜱虫的猫。参与收集有效性和安全性数据的所有人员（例如检查兽医）对治疗不知情。所有治疗均由不参与任何其他研究活动的单独研究人员（配药员）分配。这些研究是按照良好临床实践（VICH 指南 GL9，EMEA，2000）进行的，研究方案由硕腾伦理审查评估小组审查和批准。

2.1

动物

招募对象仅限于拥有三只或更少猫的家庭。每个家庭中的登记一只猫为主要患者，只有这只猫接受了疗效评估。与登记猫生活在同一家庭的其他猫被招募为补充患者并接受相同的治疗，但仅评估安全性。被登记患者在登记时必须携带 5 只活跳蚤或 3 只活的附着的蜱。在每个诊所内，将登记的猫以 2:1 的比例随机分配到两个治疗组（在每个研究中分开），这样每两个患者接受赛拉菌素+沙罗拉纳新滴剂的同时，就有一名患者在跳蚤研究中接受了阳性对照产品（吡虫啉/莫昔克丁（猫用Advocate®，Bayer），在蜱研究中接受了非泼罗尼（Frontline® 滴剂, Merial）。跳蚤研究中的补充猫必须登记和治疗；而在蜱研究中，补充猫的登记和治疗是可选的。怀孕、哺乳或打算繁殖的猫未被纳入研究。所有猫在纳入研究时都接受了兽医的身体检查。每只动物都在其主人的书面知情同意下登记治疗管理。

猫连续三个月接受治疗；第 0 天指定首次治疗。第 30 天和第 60 天的后续治疗和评估可在目标日期的 ±3 天进行，但报告为第 30 天和第 60 天。所有治疗均根据研究开始前为各诊所提供的随机化计划进行分配。治疗基于第0天、第30天和第60天记录的体重。以6.0-12.0mg/kg赛拉菌素和1.0-2.0mg/kg沙罗拉纳的推荐剂量给动物给药。在针对跳蚤的研究中，阳性对照产品按照制造商的标签说明给药，剂量为 10-20 mg/kg吡虫啉和 1-2 mg/kg莫昔克丁。在对蜱的研究中，阳性对照产品按照制造商的标签说明给药，以提供 7.5-15 mg/kg 非泼罗尼。所有治疗均直接局部应用于皮肤。

2.2

功效评估

在第 0 天和第 14、30、60 和 90 天（目标日的±3 天）治疗前对登记的猫进行寄生虫计数。猫需彻底检查（并使用跳蚤梳子梳理）至少 10 分钟，直到清除所有跳蚤和/或蜱虫。对收集的寄生虫进行计数并在室温下储存在酒精溶液（至少 70%）中。跳蚤的种类和性别，以及蜱的种类、发育状态和性别（仅限成虫）是在一个中央寄生虫学实验室（布达佩斯寄生虫学和动物学部）立体显微镜下识别的（Szabó , 1975; Hillyard, 1996; Estrada-Pena 等人, 2004)。蜱的充血状态是通过目测蜱的盾板来确定的。

在对跳蚤的研究中，在第 0 天和第14, 30, 60 和 90天治疗之前，还对每只猫进行了彻底的跳蚤过敏性皮炎 (FAD) 临床症状的检查，包括但不限于瘙痒、红斑、鳞屑、脱毛和皮炎。检查兽医按照四个级别评估临床症状的严重程度，即无症状、轻度、中度或重度。

2.3

安全性评估

所有只要接受过一次治疗的猫（登记和补充的）都包括在安全性评估中。在第 0 天、第 30、60 和 90 天，所有猫在治疗前都接受了兽医的身体检查。登记的猫在第 14 天接受了兽医的额外身体检查。在兽医体检过程中或主人两次就诊之间观察到的所有异常健康事件都被记录下来。

2.4

数据分析

每个家庭的登记的猫是实验单位。在每个治疗后就诊日（第 14、30、60 和 90 天）计算疗效，与每只动物的治疗前计数（在第 0 天记录）相比，活寄生虫计数的平均减少百分比，使用以下公式计算：

在跳蚤和蜱研究中分别计算了对所有跳蚤和蜱物种的效力。此外，还计算了对每种跳蚤和蜱种的功效。每次就诊时进行赛拉菌素/沙罗拉纳与阳性对照产品疗效的非劣效性检验，在单侧显著性水平为 0.025 时使用 15% 的非劣效性边际。如果赛拉菌素/沙罗拉纳与阳性对照疗效差异的95%置信区间下限大于-15%，则该时间点赛拉菌素/沙罗拉纳不劣于阳性对照品。如果 95% 置信区间的下限大于 0，则组合的百分比功效优于阳性对照产品。FAD 临床症状的改善是针对被兽医确定为患有 FAD 的猫进行评估的。根据严重程度类别计算具有每种 FAD 临床症状的猫的数量和百分比。

3、结果

3.1

动物

在对跳蚤的研究中，总共有277 只登记的猫（185 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗和 92 只接受吡虫啉/莫昔克丁治疗）和 170 只补充猫（120 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗和 50 只接受吡虫啉/莫昔克丁治疗）。在法国（n = 9）、匈牙利（n = 7）、德国（n = 9）和意大利（n = 8）的总共 33 个研究地点招募了猫。赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组的猫平均年龄为 4.9 岁（范围从 3 个月到 22 岁），平均体重为 3.99 千克（范围从 1.0 到 9.6 千克）。吡虫啉/莫昔克丁治疗组的猫平均年龄为 3.9 岁（范围从 3 个月到 17 岁），平均体重为 4.06 千克（范围从 1.0 到 8.4 千克）。总共有 223 只母猫（占所有猫的 49.9%；149 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗，74 只接受吡虫啉/莫昔克丁治疗）和 224 只公猫（占所有猫的 50.1%；156 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗和 68只接受吡虫啉/莫昔克丁治疗）被纳入研究。在这 447 只猫中，75.4% (n = 337) 是短毛，15.0% (n = 67) 是中等长度毛发，9.6% (n = 43) 是长毛，两个治疗组的分布相似。猫是欧洲短毛猫(56.2%)、混合品种 (24.2%)、欧洲长毛猫 (5.6%) 或记录的其他 18 个品种中的任何一种 (14.0%)。在赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组中，10 只猫（5 只登记猫和 5 只补充猫）因各种与治疗无关的原因而退出。在吡虫啉/莫昔克丁治疗组中，一只登记的猫因车祸死亡而被移出研究。因此，共有271 名登记的患者和 165 名补充患者完成了针对跳蚤的研究。在针对蜱虫的研究中，200 只登记猫（133 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗和 67 只接受非泼罗尼治疗）和 70 只补充猫（47 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗和 23 只接受非泼罗尼治疗）入选。在法国（n = 8）、匈牙利（n = 7）、德国（n = 11）和意大利（n = 7）的总共 33 个研究地点招募了猫。赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组的猫平均年龄为 4.8 岁（范围从 3.5 个月到 20 岁），平均体重为 4.37 千克（范围从 1.3 到 8.5 千克）。非泼罗尼组猫的平均年龄为 4.7 岁（范围从 6 个月到 16 岁），平均体重为 4.29 千克（范围从 2.2 到 7.2 千克）。总共有 104 只母猫（占所有猫的 38.5%；67 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗，37 只接受非泼罗尼治疗）和 166 只公猫（占所有猫的 61.5%；113 只接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗，53 只接受非泼罗尼治疗）入选。在这 270 只猫中，78.1% (n = 211) 是短毛，13.3% (n = 36) 是中等长度毛发，8.5% (n = 23) 是长毛，两个治疗组的分布相似。猫是欧洲短毛猫 (71.5%)、混合品种 (10.4%)、欧洲中毛猫 (5.9%) 或记录的其他 13 个品种中的任何一种 (12.2%)。在赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组中的5 只猫（3 只登记和 2 只补充）和非泼罗尼治疗组中的 2 只猫（1 只登记和 1 只补充）由于与治疗无关的各种原因而退出。因此，共有196 只登记患者和 67 只补充患者完成了蜱虫研究。

3.2

对跳蚤的功效

在猫身上发现的所有跳蚤都被鉴定为猫栉首蚤。跳蚤研究的结果总结在表 1 中。赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组和吡虫啉/莫昔克丁处理组登记时每只猫活跳蚤计数的算术平均值为9.9（范围从 5 到 66）和10.6（范围从 5 到 84 )。在治疗开始后的第 14、30、60 和 90 天，赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组的有效率分别为97.4%、97.3%、98.8%和99.4%，吡虫啉/莫昔克丁治疗组的有效率分别为90.0%、83.6%、87.7%和96.3%。赛拉菌素/沙罗拉纳在所有时间点均不劣于吡虫啉/莫昔克丁。

赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组中 14 只猫和吡虫啉/莫昔克丁治疗组中的 2 只，在招募时被确定为患有 FAD。两组治疗后，所有猫的跳蚤过敏性皮炎（脱毛、皮炎、红斑、瘙痒和鳞屑）的临床症状均有改善。

3.3

对蜱的功效

3.3.1. 对蜱的总体功效

表 2 总结了对所有蜱种的功效。登记时活蜱计数的算术平均值赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组为 4.7（范围从 3 到 22），非泼罗尼治疗组为 4.6（范围从 3 到 14) 。在治疗后第 14、30、60 和 90 天，赛拉菌素/沙罗拉纳治疗组的有效率分别为 96.7%、92.6%、98.8% 和 99.5%，非泼罗尼治疗组的有效率分别为 90.2%、74.6%、83.4% 和 93.4% %。赛拉菌素/沙罗拉纳的疗效百分比在所有时间点均不劣于非泼罗尼，并在第 30 天和 60 天优于非泼罗尼。

3.3.2. 对个别蜱种的功效

招募时，149 只登记猫（赛拉菌素/沙罗拉纳组 98 只，非泼罗尼组 51 只）感染了蓖子硬蜱，42 只登记猫感染了血红扇头蜱（赛拉菌素/沙罗拉纳组29 只，非泼罗尼组 13 只）。感染了蓖子硬蜱和血红扇头蜱的猫的数量，不同研究天数的最大蜱数和疗效见表3。有限数量的猫（n = 16；赛拉菌素/沙罗拉纳组7只，非泼罗尼组9 只）被网纹革蜱或六角硬蜱感染（n = 14；赛拉菌素/沙罗拉纳组 10只，非泼罗尼组4只）。一些猫有不止一种蜱虫的混合感染。表 4 提供了 4 个不同国家在招募时（第0天）不同蜱种的存在情况。

用赛拉菌素/沙罗拉纳治疗后，到第14天，所有蜱虫的感染发生率均大幅下降。更具体地说，在整个研究过程中，赛拉菌素/沙罗拉纳对六角硬蜱和网纹革蜱的疗效均为100%。在第14、30、60和90天，赛拉菌素/沙罗拉纳对蓖子硬蜱的有效性分别为96.1%、89.3%、98.7%和99.8%。在第14、30、60和90天，赛拉菌素/沙罗拉纳对血红扇头蜱的有效性分别为100%、98.0%、99.1%和98.6%。非泼罗尼对蓖子硬蜱的作用较弱，第14、30、60和90天有效性分别为84.3%、66.5%、75.4%和87.7%。在第 14、30、60 和90 天，对血红扇头蜱有效性分别为100%、97.4%、96.9% 和 98.5%。在所有研究日，非泼罗尼对网纹革蜱的有效性为100%，对六角硬蜱的有效性为>93.8%。

3.4

安全性

任何接受赛拉菌素/沙罗拉纳治疗的猫都没有出现与治疗相关的严重不良事件。在跳蚤研究中，共有九起异常健康事件被认为可能与治疗有关。据报道，在三次治疗中的一次给药后，两只经赛拉菌素/沙罗拉纳治疗的猫在用药部位出现轻度至中度脱毛。在其他六只经赛拉菌素/沙罗拉纳治疗的猫中，在治疗后记录到轻微和短暂的瘙痒。在这六只动物中，有一只在两次治疗后观察到瘙痒，但在其他五只猫中仅在一次治疗后观察到瘙痒。在一只吡虫啉/莫昔克丁治疗的猫中，在三次治疗中的一次给药后观察到毛发变色。在对蜱虫的研究中，报告了 6 只猫出现异常健康事件，这些事件被认为可能与治疗有关。在第0天治疗后，每个治疗组均有一只猫立即出现轻度流涎。其中一只猫（非泼罗尼组）在第60天治疗后再次出现流涎，但在第30天没有。在所有病例中，给药后几分钟内流涎停止。在第 60 天，一只接受了赛拉菌素/沙罗拉纳治疗的猫在给药部位被诊断出患有局部轻度脱毛。在治疗后即刻的观察期间，在两只赛拉菌素/沙罗拉纳治疗的动物和一只非泼罗尼治疗的动物观察到短暂的瘙痒。在两个治疗组中，这些异常健康事件的发生频率相似，而且都是在猫局部用药后并不意外的事件（用药后的瞬间流涎和给药部位出现短暂的抓挠）。

4、讨论

赛拉菌素+沙罗拉纳猫用新滴剂 (Stronghold® Plus) 每月局部给药一次，对猫自然感染的跳蚤和蜱虫是安全且高效的。赛拉菌素/沙罗拉纳对跳蚤和蜱的功效分别不劣于吡虫啉/莫昔克丁（猫用 Advocate® , Bayer）和非泼罗尼（Frontline® 滴剂, Merial）。

考虑到沙罗拉纳 (Simparica®; McTier 等, 2016) 和赛拉菌素 (Stronghold®; Benchaoui 等, 2000; McTier 等, 2000; McTier 等, 2000；Ritzhaupt 等，2000 年；Paarlberg 等，2013 年）对跳蚤已知的杀灭效果，预期其对跳蚤有很好的疗效。在实验室研究中，赛拉菌素+沙罗拉纳新滴剂配方对抗跳蚤的功效也得到证实（Becskei 等, 2017）。赛拉菌素/沙罗拉纳治疗降低了猫与 FAD 相关的临床症状的严重程度，如之前对赛拉菌素治疗的描述（Dickin 等，2003）。鉴于Kopp等（2013年）和Dryden等（2011年）提出的4周持续有效性声明和不存在吡虫啉抗性，在本临床研究中观察到吡虫啉/莫昔克丁对跳蚤的低效力，且仅在三个月治疗后才达到95%以上的有效性，这实在令人惊讶。较低的药效可能反映了在继续使用吡虫啉后，临床中对吡虫啉的耐受性增加，因为在实验研究中确实报道过吡虫啉在接近一个月治疗间隔结束时对KS1菌株的药效下降（Dryden 等，2005）。

研究还发现猫的新赛拉菌素/沙罗拉纳滴剂对所有蜱种都非常有效，在所有时间点对蜱的总体有效率为 >92.6%。此前在实验室研究中证实了其对蓖子硬蜱、六角硬蜱、血红扇头蜱和网纹革蜱的高持久性（Geurden 等, 2017）。赛拉菌素/沙罗拉纳在所有时间点均不劣于对照组非泼罗尼，并且在第 30 天和第 60 天优于对照组非泼罗尼。非泼罗尼在第30天和第60天对所有蜱种的总体有效率均在90%以下，对蓖子硬蜱的总体有效率在所有时间点均在90%以下。正如之前报道的（Becskei等, 2017; Geurden 等, 2017），本研究证实了，赛拉菌素沙罗拉纳猫用新滴剂配方可持续5周持续对抗跳蚤、蓖子硬蜱和六角硬蜱，并可持续4周对抗血红扇头蜱和网纹革蜱。

在野外条件下，猫会不断受到来自环境的跳蚤和蜱虫的再次感染。因此，体外寄生虫药应在治疗期结束前提供持久的效力，以保护动物免于再次感染。这不仅是减少这些外寄生虫对受感染猫的直接临床影响所必需的，而且对于帮助减少媒介传播病原体的传播也很重要，因为这与猫群有直接的临床相关性，并打破这些病原体的流行病学循环。赛拉菌素+沙罗拉纳猫用新滴剂配方提供了实现这一目标所需的高效持久的抗蜱和抗跳蚤功效。

5、结论

按月给药赛拉菌素+沙罗拉纳新滴剂配方，剂量范围为6.0-12.0 mg/kg赛拉菌素和 1.0-2.0 mg/kg沙罗拉纳，可安全且高效地杀灭猫自然感染的跳蚤和蜱虫。特别是在猫持续暴露于蜱虫和跳蚤自然再感染的条件下时，新滴剂配方可在每个月的给药间隔内提供持续、高效的杀灭能力。

利益冲突

此处报告的研究由硕腾资助。RF 是独立的投资者，并进行了所有跳蚤和蜱的物种鉴定。所有其他作者都是硕腾的现任员工。所有作者都协助研究的设计和实施、数据的解释和手稿审查。没有可能影响这些研究的实施和报告的利益冲突。

致谢

作者要感谢 Filip De Bock 对两项研究的宝贵贡献。作者感谢参与研究的兽医及其诊所工作人员的奉献精神，感谢宠主的参与以及 Monika Gyurkovszky 的寄生虫鉴定实验室工作。

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