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以犬牙菌斑试验为案例,分析益生菌在口腔中的应用研究

2022-11-30 1153 返回列表
益生菌在口腔中的应用研究

1、益生菌与口腔
口腔中有几百种细菌,这些细菌与口腔是相生相依的。依据这些细菌对口腔作用简单被划分为有害菌和有益菌。有害菌是对口腔造成危害的细菌,主要有变异链球菌、远缘链球菌以及具核梭杆菌等。这些有害菌存在于口腔中,并能将口腔中残留的食物残渣分解成酸,或者其他有害物质,进而腐蚀我们的牙齿和牙龈,同时还会释放硫化氢气体——一种导致口臭的病因。
而有益菌则是对口腔有益处的一类菌,故被称作益生菌,比如副干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌等。这一类益生菌主要通过与口腔中有害菌竞争黏膜表面的结合位点,减少致病菌的定植,并能分泌有机酸、过氧化氢和细菌素等多种抗菌物质,从而抑制致病菌的生长,达到平衡口腔菌群,预防口臭和口腔疾病,清新口气的作用。
益生菌本身是一类定植于人体,能改善宿主微生态平衡,发挥有益作用的活性微生物的总称,主要来源于乳杆菌属﹑乳球菌属、链球菌属、双岐杆菌属和酵母菌属等。口腔内定植的细菌达700多种,可致多种感染性疾病的发生。而多项体外及临床试验表明有益生作用的常驻菌在预防口臭、牙周疾病、口腔念珠菌病等口腔疾病中发挥着重要的作用,而这与益生菌能在口腔中定植有直接关系,研究显示鼠李糖乳杆菌经口摄入后可在口腔粘膜定植两周,唾液链球菌K12对多种口腔细胞有粘附性,容易在口腔内定植。其研究表明在口腔内更易定植的菌发挥的有益效果会更佳明显。
2、益生菌与清新口气
目前国内外的众多研究表明,益生菌在清新口气方面具有一定的作用。口气的产生主要由口腔内细菌,尤其是由聚集在舌后1/3处的革兰阴性厌氧菌发酵产生的挥发性硫化物所引起的。90%的口臭根源来自口腔,也有部分是由肠道的问题导致的。Delanghe G等报道,益生菌能同时解决口腔和肠道问题,有效防治口臭。Kang 等报道使用含益生菌的漱口水漱口能显著降低挥发性硫化氢的产生。lwamoto等给口臭患者服用益生菌后,发现口臭的各项指标明显下降,患者口臭的感官评分降低,牙周探针时出血减少。另有研究发现健康年轻人早晚嚼服益生菌的口香糖后,口臭的感官评分降低。
研究表明,含益生菌牙膏相比空白对照组能够平衡口腔菌群,强化口腔自我清新能力,清新口气,祛除口腔异味。
为了研究益生菌和口臭致病菌直接作用的效果,杨雯洁等通过体外培养益生菌对代表型口臭致病菌牙龈吓啉单胞菌、具核梭杆菌抑菌作用。该实验将益生菌与上述两种有害菌进行混合厌氧培养6h、12h、24h和48h,观察其竞争排斥实验结果。实验结果表明益生菌对代表型口臭致病菌牙龈吓啉单胞菌、具核梭杆菌具有显著拮抗作用,同时益生菌的代谢产物中存在有效的抑菌物质,特别是对Pg 生长具有显著的拮抗作用,而这进一步表明益生菌作为对宿主有益的菌,对口臭致病菌有良好的抑制作用有望应用于今后的口臭临床治疗。
通过大量的文献研究显示,益生菌对致臭菌的作用机理可能在于:无论是添加在牙膏、漱口水、口香糖中或直接作用的益生菌可与致臭菌竞争口腔粘附位点或产生细菌素(即益生菌的副产物)抑制产生挥发性硫化物细菌的量,减少致臭菌定植,从而降低口腔挥发性硫化物量。
3、益生菌与牙周健康
牙周病发生的外在表现形式主要为牙菌斑、牙结石。有研究表明益生菌可通过降低口腔pH值,防止牙菌斑和牙结石的形成,同时抑制有害菌,以防止牙周病的发生,维护牙周健康。
益生菌在牙周健康方面的研究有很多。Gruner等、Gungor等、Matsubara等、Twetman andKeller等的研究先后得出适量的益生菌能治疗牙周病的结论。Matsubara等证实益生菌能改善牙周病患者的牙周状况。Gungor等采用益生菌干预后,探测出血、牙龈指数和探测袋深度明显减少。对于牙周病原菌,现有的实验和临床研究发现,益生菌菌株可以减少牙周病原菌数量,包括聚集放线菌、牙龈吓啉单胞菌、中间普雷沃特菌和具核梭杆菌。其中牙龈吓琳单胞菌和具核梭杆菌是口臭的主要致病菌。还有研究发现,牙龈健康者服用益生菌饮品28d后,可以降低因碳水化合物饮食产生的牙龈炎症反应。但Slawik S等的研究发现牙周病患者服用罗伊氏乳杆菌含片后,牙菌斑的组成和炎症因子同安慰剂组相比并无明显差异。
Honkala2.A等通过临床试验研究鼠李糖乳杆菌和乳酸双岐杆菌含片对青少年牙龈健康、牙菌斑和牙周病原的影响,测定益生菌干预组和空白对照组对青少年牙龈健康和牙菌斑以及四种可能的牙周病原的影响。研究结果表明,与对照组相比,益生菌组的牙龈指数明显降低,菌斑水平受牙龈指数影响也明显降低,从而能改善牙周健康。
一些临床研究表明,益生菌还能减少口腔念珠菌的数量。


益生菌牙膏缓解犬牙菌斑和牙结石的试验

1、试验方法
(1)试验设计
将10只比格犬分为阴性对照组和益生菌牙膏组,每组5只,试验第0天对所有犬进行洁牙抛光处理。阴性对照组的犬正常饲喂犬粮;益生菌牙膏组的犬每次餐后约0.5h给予约4 g/只益生菌牙膏,用棉签均匀涂抹在犬口腔牙齿表面,等待约30 s,防止犬舔舐,30 s后可自由饮水。益生菌牙膏每天给予2次,连续使用28 d。
(2)测定指标及方法
①牙菌斑评分:连续使用益生菌牙膏28 d,在试验第14天、试验第29天各统计每只犬牙齿的牙菌斑情况1次,用菌斑显示剂对测试的牙齿进行染色并用纯水冲洗,参考Turesky等9人改良的Quigley-Hein法对测试牙齿的牙菌斑判定评分,并拍照记录。
②牙结石评分:试验第29天统计完每只犬牙齿的牙菌斑情况后,使用 Warrick-Gorrel法统计测试牙齿的牙结石评分。
③口腔气体挥发性化合物浓度检测
试验第29天使用韩国Twin Breason Ⅱ唐伯森口臭检测仪对动物口腔气体挥发性化合物H,S和CH,SH的浓度进行检测。
2、结果与分析
(1)益生菌牙膏对犬牙菌斑形成的影响
由表1可知,试验前所有犬都进行了洁牙处理,所以第0天的犬牙菌斑评分均为0;连续给予益生菌牙膏第14天,阴性对照组、益生菌牙膏组犬牙菌斑评分分别为5.61±1.95、5.63±2.18(见表1);与阴性对照组相比,益生菌牙膏组口腔牙菌斑评分均值减少-0.36%(见表2)。试验第29天,阴性对照组、益生菌牙膏组动物牙菌斑评分分别为9.78±2.93、7.68±1.23(见表1);与阴性对照组相比,益生菌牙膏组口腔牙菌斑评分均值减少21.47%(见表2),说明此款动物益生菌牙膏具有减少犬牙菌斑产生的功效。
(2)益生菌牙膏对犬牙结石形成的影响
由表3可知,试验第29天,阴性对照组、益生菌牙膏组犬牙结石评分分别为1.09±0.40、1.02±0.44(见表3);与阴性对照组相比,益生菌牙膏组口腔牙结石评分均值减少幅度6.54%(见表4),低于15%,说明该公司生产的此款益生菌牙膏不具有减轻犬牙结石生成的功效。
(3)益生菌牙膏对犬口腔气体挥发性化合物浓度的影响
由表5可知,试验第29天,阴性对照组、益生菌牙膏组犬口腔气体挥发性化合物的浓度分别为(0.74±0.67)ng/10 mL、(1.07±0.44)ng/10 mL;益生菌牙膏组犬口腔气体挥发性化合物浓度均值减少幅度为-44.59%(见表6),低于15%,说明此款动物益生菌牙膏不具有降低犬口腔气体挥发性化合物浓度的功效。
3、讨论
本文试验中,餐后涂抹益生菌牙膏的犬牙菌斑沉积量明显低于阴性对照组的犬。而益生菌牙膏组犬在连续给予益生菌牙膏28d后,第29天检测牙结石和口腔气体挥发性化合物浓度的减少功效分别为6.54% 、-44.59% ,均低于15%,说明此款动物益生菌牙膏不具有降低口腔气体挥发性化合物浓度和牙结石的功效,这可能与受试物的性状或益生菌成分有关。

虽然试验中发现益生菌牙膏能够降低牙菌斑的形成,但试验时间有限,不能证明此款益生菌牙膏能够完全阻止牙结石的生成。由于牙结石的形成是牙齿在萌出之后会被一层薄膜覆盖,其主要是由于唾液蛋白选择性地吸附在牙釉质的表面而形成的。犬长期摄食柔软的食物或流质食品,食物残渣和口腔中的细菌容易附着在该薄膜上,进而形成牙菌斑和牙垢。牙结石由牙菌斑或牙垢通过与犬唾液中某些成分相互作用从而引起钙磷沉积形成。该研究结果表明,在犬的饲喂过程中,补充益生菌牙膏可以有效减少牙菌斑在牙齿表面的堆积,但不能降低犬口腔气体挥发性化合物的浓度。


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