来源:知宠健康
日常生活中宠物受伤在所难免,创伤后皮肤破裂或手术后皮肤创口都可能导致伤口(或切口)延迟愈合。如果伤口愈合过程受到负面影响,则可能导致伤口感染或更严重的后果。
如何加速伤口愈合速度呢?
国内学者的研究建立了一种新型直接注射的间充质干细胞制剂(MSCs),用于治疗1例由自体敏感导致的猫创口延迟愈合.治疗后21D,伤口完全愈合。MSCs的局部植入成功促进了溃烂伤口的皮肤再生,并促进了毛发再生.研究结果为进一步推动干细胞治疗宠物疾病提供了切实可行的治疗剂型并提供了良好的治疗案例。
传统MSCs的应用方法包括静脉输注、局部注射等方式.MSCs治疗一个疗程通常需要多次输注,且MSCs分次输注操作繁琐。MSCs的保存、培养条件及操作人员的变化也影响着 MSCs治疗的效果。于是将 MSCs疗法用于宠物临床中某些发病急、病程快的疾病则面临着诸多困难,受限于操作时间和操作平台无法大规模应用于疾病治疗,虽然国内学者致力于解决中短途的运输问题,但仍不能满足大规模制备和长期保存 MSCs以用于临床疾病治疗。
区别于传统MSCs准备时间长,操作要求高、保存时间短的缺点。
新型MSCs用甜菜碱和海藻糖作为细胞制剂的主要冷冻保存组分.在 MSCs制剂中添加褪黑素,米托蒽醌甲磺酸盐及胶原蛋白以促进 MSCs的存活和疗效。
病例情况:2022年10月西安家佳宠物医院接诊1例雌性加菲猫膀胱结石,进行开腹手术取出结石。术后2月创口无法愈合,伤口四周红肿(图1)。可能与前期手术、年龄、自体敏感等因素相关,导致伤口处皮肤再生能力减弱。由于创口反复感染化脓,传统治疗方式尝试2个月后仍无法治愈。
为了促进该病例的良好预后,将间充质干细胞与多种小分子组合,治疗猫的创伤延迟愈合。使用了一 种新型直接使用 MSCs剂型,以保证 MSCs治疗的时效性和便携性, 并完全治愈了猫延迟愈合的旧创,显示了干细胞治疗的强大优势。
配置使用方法:
1:间充质干细胞扩增
MSCs经37℃水浴复苏后经1000r/min离心3min,去除上清液后加入含10% FBS的α-MEM 重悬,接种于100 mm 培养皿中.MSCs在 5%CO2培 养 箱 中 37℃ 培 养.待MSCs增殖至80%~90%时,弃去培养液。用 PBS洗去残余培养液后,加入0.25%胰酶,37℃消化3~5min,加入与胰酶等量培养液终止消化,转入离心管中1100r/min离心3 min。弃去上清后加入新α-MEM 重悬,转入100mm 培养皿中继续培养.待细胞长至80% ~90% 时,用上述消化方式消化MSCs。
2:间充质干细胞制剂制备
将得到的MSCs用含10% FBS的 α-MEM 重悬,加入80μg无水甜菜碱,20μgD-海藻糖充分混匀.加入10-6mmol/L 褪黑素,10-6mmol/L MitoQ 及10μg胶原蛋白,重 悬 混 匀 后 加 入 细 胞 冷 冻 保 存 管,置 于-80℃保存.
3:治疗方法及预后
经医师或在医师指导下清理创面,使创口环境有利于愈合.将干细胞制剂自冰箱取出,水浴或手持解冻使其恢复至室温;使用注射器对细胞制剂反复吹打混匀,使细胞制剂不可见絮状物质;将细胞制剂于伤口四周皮下注射,注射位置应尽量均匀分布在创口周围,持续监测患宠损伤部位恢复情况。
4:结果
该病例手术创口经两月余无法愈合,皮肤伤口处红肿,持续感染化脓,多次清创再缝合均无法治愈 .经 MSCs治疗第0天,组织坏死,溃烂,充血伤口渗 出 血 液 及 纤 维 蛋 白 原. 清 创 后 局 部 注射MSCs制剂.第1天及第2天创口逐渐收缩,长出肉芽组织.治疗第3天至第5天创口收缩,愈合速 度加快,创 口 范 围 逐 渐 缩 小,由 4cm 逐 渐 缩 小 至2.5cm.第5天至第18天伤口表皮组织增生,创口收缩,化脓及红肿等不利症状消失.第21天至第33天创口完全愈合,并长出毛发(图2).对创口表面信息进行定量分析(图3).
5:结论
传统MSCs疗法局限于极短的保存时间、繁琐的操作步骤及较高的操作要求,在宠物治疗应用中往往不能及时发挥治疗作用。褪黑素、MitoQ、 胶原蛋白等可有效促进MSCs的体外活力.学者研究集合了多种 促 进 MSCs活力的小分子,并改良MSCs的保存条件,制备了快速、便捷、作用效力强的新型 MSCs制剂,对1例临床猫创口延迟愈合进行治疗.证明新型MSCs制剂治疗效果较好.通过促进皮肤组织愈合,改善机体微环境,使预后不良的创口加速愈合过程.