上篇文章我们讲述了分别在耳道、皮肤和爪部褶皱处如何进行采样,本文则接着讲采样后,能观察到的几种细胞学结果,或者说如何看!
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基本显微镜
始终从低倍镜开始!
在观察细胞学制剂时最常见的错误是直接放大100倍进行观察。从4×开始,可以识别玻片的特定区域,以便在更高的功率下进行检查。它还可以观察到100倍镜可能会遗漏的地方,如棘细胞和蠕形螨(图4和图5)。
图4 棘细胞
图5 蠕形螨
随着放大倍数的增加,光强度也会增加。当寻找蠕形螨或真菌孢子时,降低冷凝器,使光强度不会“燃烧”这些微生物。
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炎性细胞
炎性细胞几乎见于所有皮肤细胞学检查,偶尔见于耳道和爪褶细胞学检查。不同的炎性细胞,可能指向怀疑某些疾病,例如天疱疮综合征、皮肤狼疮、粘膜皮肤脓皮病,甚至过敏。
中性粒细胞
中性粒细胞是一种急性炎症细胞,可破坏感染性物质,是脓液的主要成分。应检查胞内菌,因为这些细菌的存在说明皮肤感染真正存在。有大量细菌而没有胞内菌可能是免疫抑制(如库欣病、甲状腺功能减退症、肿瘤)或细菌过度生长的结果。鉴于目前对抗生素耐药性的担忧,笔者建议首先使用抗生素产品(如氯己定、微粉化银、Triz EDTA)局部治疗这些病例。中性粒细胞释放许多导致炎症和组织损伤的蛋白水解酶(图6)。
图6 中性粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜酸性粒细胞充满红色(嗜酸性的)颗粒(图7)。嗜酸性粒细胞产生大量细胞因子和介质来杀死微生物并吸引其他细胞,如肥大细胞。这些细胞也是吞噬细胞,能够摄取细菌和真菌。在皮肤细胞学检查中发现嗜酸性粒细胞表明存在寄生虫、真菌或食物过敏。嗜酸性粒细胞很少在患有特应性皮炎的狗身上发现,尽管它们在猫身上很常见。
图7 嗜酸性粒细胞
淋巴细胞
淋巴细胞通常在皮肤病的后期出现,通常不会大量出现。可见小、中、大淋巴细胞。这些细胞通过释放各种信息分子或细胞因子来指导其他细胞(如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、角化细胞)的活动。患有皮肤淋巴瘤的狗有时会出现大淋巴细胞(图8)。
图8 非典型性淋巴细胞(符合皮肤淋巴瘤)
肥大细胞
肥大细胞也在疾病过程的后期被发现(图9)。它们是组胺的主要产生者,在很大程度上与过敏性皮肤病有关。通常仅在真皮肥大细胞肿瘤的溃疡区域可见。
图9 肥大细胞
3
核流
当细胞在取样过程中破裂时,细胞核内容物(DNA)通常出现在细胞学检查中。核流看起来像嗜酸性物质的细线(图10)。它仅指示样本采集过程中细胞破裂。它可以帮助勾勒出真菌孢子、细菌和酵母的轮廓,所以可以在有大量核流的区域寻找这些微生物。
图10 核流
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寄生虫
如果感染足够严重,在细胞制剂上可能会看到蠕形螨、耳痒螨、疥螨或其他螨虫。这些是较大的微生物,最好用4倍至10倍的放大倍数进行观察。它们并不常见,但如果观察到,则具有诊断价值。
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真菌
在中性粒细胞中可以看到来自皮肤真菌(癣)的真菌孢子,可以是游离的,也可以存在于核流中。这些非常小、圆形的微生物具有清晰的光环和嗜碱性中心(图11)。它们大约是一个普通红细胞大小的一半。
图11 真菌孢子
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酵母
酵母有两个属:马拉色菌在美国比假丝酵母更常见,假丝酵母在欧洲更常见。马拉色菌被描述为花生、雪人、脚印或保龄球形状的嗜碱性微生物。
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细菌
细菌是笔者在细胞学检查中发现的最常见的感染性微生物。最常见的是两种不同的形状:球菌和杆菌。球菌是圆形的嗜碱性细菌,可单独、成簇或成群发现(图10)。如果发现细胞内球菌,则存在真正的感染。杆菌通常被单独发现,或以两个端对端放置的杆为一组,称为二倍体杆(图12)。球菌最常见的是葡萄球菌或链球菌。杆菌通常是大肠杆菌、假单胞菌或克雷伯菌。记住,快速染色会将所有细菌染成紫色;他们无法区分革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。在细胞学检查中发现棒状物时,应进行细菌培养。
图12 杆菌
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黑色素颗粒
黑色素颗粒通常被误认为是细菌,通常出现在皮肤的色素区域。它们的颜色从金色到棕色,大多呈杆状;当进入和离开细焦点时,它们具有折射/反射的特征(图13)。黑色素颗粒通常附着在角化细胞上,但在玻片上可以看到它们是游离的。
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角化细胞
大多数角质细胞为八角形至方形和组成为鳞状。角质形成细胞可能表现出一些有趣的特征,这些特征可能是正常的或异常的,例如包括透明角质颗粒或圆形棘细胞。
透明角质颗粒
这些颗粒存在于颗粒层中的未成熟皮肤细胞中,并在完全成熟时参与将细胞“粘合”在一起。所有物种都有这些颗粒,这些颗粒可能出现在慢性刺激的角化细胞中(例如,过敏的狗/猫)。透明角质颗粒是大的嗜酸性颗粒。狗有圆形颗粒,猫有杆状颗粒(类似于嗜酸性粒细胞;图14)。
棘细胞
这些角化细胞在表皮深处失去了细胞间联系,通常在患有免疫介导疾病的动物中发现,如天疱疮。偶尔,严重的细菌感染和皮肤真菌病会导致这些细胞发育。棘细胞呈“煎蛋”状,具有一个深度嗜碱性、位于中央的细胞核(图4)。这些对识别非常重要,在任何动物中都被认为是异常的。
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原文作者:Chris Reeder
原文链接为:
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