集宠学苑 | 两种犬骨关节炎疗法的随机、对照和双盲临床试验

[摘要]

犬用4CYTE™共含有四种有效成分：三种海洋生物成分以及从侧柏籽中提取的Epiitalis®。卡洛芬是一种非甾体抗炎药(NSAID)，广泛应用于犬骨关节炎的治疗。本研究旨在比较犬用4CYTE与卡洛芬在治疗犬骨关节炎疼痛方面的效果。该试验是针对自然老化发生骨关节炎的犬只，开展的一项随机、双盲、平行试验。最终，66只体重在10-50kg之间的犬完成试验。犬用4CYTE每日喂食剂量为60mg/kg。卡洛芬每日给药量为2-4 mg/kg，试验第一天的负荷剂量高达4 mg/kg。试验期共28天，分别使用3项评分来判定，即宠主跛行评分（OL）、兽医跛行评分（VL）和宠主灵活度评分（OM）。分析宠主对犬的跛行评分，第28天与第0天相比有明显改善。兽医对跛行评分和宠主对其灵活度评分也是重要的测试指标。第28天，29只4CYTE测试犬中有14只（48.3%）在兽医跛行评分和宠主灵活度评分中有明显改善，而37只卡洛芬测试犬中只有13只（35.1%）在上述2项评分中被判定为明显改善。从宠主对犬灵活度评分来看，第14天，4CYTE与卡洛芬相当。第28天，4CYTE组犬的所有三项指标评分均等同于卡洛芬。这表明犬用4CYTE的临床疗效与卡洛芬相当。而在14-28天之间， 4CYTE对关节炎的改善效果持续增强，这一点在卡洛芬组并不显现。

关键词：犬用4CYTE™；犬；骨关节炎；

慢性骨关节炎是一种犬常见病1。使用药物治疗骨关节炎旨在抑制其疼痛和炎症。卡洛芬是一种非甾体抗炎药，广泛用于治疗犬自然老化引起的骨关节炎。  

4CYTE™已在澳大利亚农药和兽药管理局注册（APVMA 69230），属于可用于临床治疗的天然兽医产品。本品含有四种成分：三种海洋生物成分和Epiitalis®。作为第二代营养保健品，是赛马专用4CYTE™ (SEQ)（APVMA65276）和Sashas关节粉（APVMA54231）的纯化升级产品。4CYTE™能够预防和治疗有骨关节炎风险或患有骨关节炎的犬的软骨损伤，并能缓解关节疼痛等临床症状。赛马用4CYTE（SEQ™）的抗炎及软骨保护作用已进行了体外2,3和体内4试验。这些研究表明，SEQ3和/或某单一成分5对白细胞介素-1（IL-1）诱导的前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）和粘多糖流失（GAG）有抑制作用。除了能够有效抑制一氧化氮（NO）外，在赛马关节内注射低剂量IL-1的体内试验也充分验证了4CYTE可以有效抑制前列腺素E2（PGE2）和粘多糖流失（GAG）4。最近在自然老化引起的关节炎的犬身上进行的一项临床研究也证明了Epiitalis治疗骨关节炎的功效6。本试验的目的是比较犬用4CYTE™与NSAID卡洛芬在治疗犬自然老化引起的骨关节炎方面的疗效，以支持该产品作为临床兽医治疗产品的监管批准。

协议

该研究是一项随机、双盲、阳性对照、平行组、非劣性临床试验。该试验获得墨尔本大学动物伦理委员会（#1011929）的批准，并符合良好临床实践原则7。研究的所有过程均在墨尔本大学兽医医院进行，具体略。

研究对象

研究对象为年龄大于6个月、10-50kg以内、有跛行迹象的犬。同时需要满足体检结果良好，且第0天无血液或临床化验异常以及影像证明其有明显的骨关节炎。试验开始前14天内未食用任何治疗骨关节炎或跛行或疼痛或抗炎的药物或相关保健品。

最终从82只犬中筛选出66只犬。82只犬中有13只（13/16，81%）是因为放射检查结果为阴性而被剔除。还有三只犬被剔除分别是因为：一只犬体重超过上限，一只犬被诊断为横纹肌肉瘤，一只犬因急性疼痛需要紧急干预。

66只犬被随机分为2组。A组犬食用4CYTE, B组犬给药卡洛芬。整个试验过程完全双盲。

喂食

按照标签剂量规定，犬用4CYTE在每日晚餐时喂食1次，持续喂食28天（表1）。卡洛芬的给药剂量为每天2-4 mg/kg，如其标签所示，在第一天可选择分次给药，其负荷剂量达4 mg/kg（表1）。

表1. 犬用4CYTE和卡洛芬给药剂量

每片卡洛芬含有50mg卡洛芬。一勺相当于大约0.3g天然活性成分Epiitalis®。

评定标准

三个衡量标准，即宠主跛行评分（OL）、兽医跛行评分（VL）和宠主灵活度（OM），是根据监管部门推荐的单向序数排名评分稍作修改后建立的，用于评估非甾体抗炎药治疗骨关节炎的疗效8。每只犬在第0、14（±2）和28（±2）天接受评估和记录，评分要求见表2。

表2. 宠主跛行评分（OL）、兽医跛行评分（VL）和宠主灵活度评分（OM）评分表

B组中的1只犬在试验第15天出现急性呕吐，被送入医院治疗。另一只犬的主人反映，其在入组和开始喂食卡洛芬期间大便带血。

在统计学上，4CYTETM在28天的三个结果[宠主跛行评分（OL）、兽医跛行评分（VL）和宠主灵活度评分（OM）]都优于或等同于卡洛芬对照组，但不属于显著差异范围。

宠主跛行评分（OL）

一、与第0天相比，第14天，有10/29只（34.5%）接受4CYTE的犬，宠主跛行评分有改善；有13/37只（35.1%）接受卡洛芬的犬，宠主跛行评分有改善。（图1）

二、与第0天相比，第28天，有14/29只（48.3%）接受4CYTE的犬，宠主跛行评分有改善；有13/37只（35.1%）接受卡洛芬的犬，宠主跛行评分有改善。

三、第14-28天，宠主跛行评分（OL）显示有7/29只（24.1%）接受4CYTE治疗的犬有改善，而布洛芬对照组仅有4/37只（10.8%）犬有改善。若去除90%置信区间差异，4CYTE略高于布洛芬组，但差异不显著。

四、与第0天相比，任何测试节点，宠主跛行评分（OL）方面有15/29只（51.7%）接受4CYTE的犬有改善，而卡洛芬对照组有16/37只（43.2%）犬有改善。

图1. 在(A) 14天或(B) 28天，(C) 14 - 28天和(D)任何时间点，，每日口服犬用4CYTE™或卡洛芬的犬宠主跛行评分无改善(黑色)或改善(条纹)的百分比。

兽医跛行评分（VL）

第14天，有10/29只（34.5%）使用4CYTE的犬和15/37只（40.5%）使用卡洛芬的犬，兽医跛行评分有改善。

第28天，有17/29只（58.6%）使用4CYTE的犬和15/37只（40.5%）使用卡洛芬的犬，兽医跛行评分有改善。

第14-28天之间，接受4CYTETM[9/29(31.0%)]的犬，兽医跛行评分（VL）的变化持续改善，比接受卡洛芬[6/37(16.2%)]的犬改善效果更明显。

宠主灵活度评分（OM）

第14天，有10/29只（34.5%）使用4CYTE的犬和8/37只（21.6%）使用卡洛芬的犬，宠主灵活度评分有改善。（图2）

第28天，有12/29只（41.4%）使用4CYTE的犬和8/37只（21.6%）使用卡洛芬的犬，宠主灵活度评分有改善。接受4CYTE治疗的犬灵活性改善比例几乎是卡洛芬的两倍。

图2. 在(A)14或(B)28天后，每日口服犬用4CYTE™或卡洛芬的犬宠主灵活度评分无改善(黑色)或改善(条纹)的百分比。

试验开始后，人们认识到如果允许体重较轻的动物，将提高研究的外部有效性。因此，对试验动物体重进行重新修改，体重下限由13kg调整为10kg。

统计学发现：犬用4CYTE在第14天的宠主灵活度评分（OM）和第28天的3种评分结果都优于或等同于卡洛芬。两者更大差别在于，4CYTE对犬跛行的改善效果在第14-28天之间持续增加，而卡洛芬则无明显持续性改善效果。这一发现与预期一致，基于4CYTE独特的作用机制，作为一种抗炎物质，其效果会逐渐累积。当4CYTE对IL-1诱导的前列腺素E2（PGE2），粘多糖流失（GAG）和一氧化氮（NO）的抑制作用发生时，3-5则会在第14天和第28天之间持续发挥作用，持续改善关节炎症，正如在赛马身上所证明的那样。

在这项研究中，卡洛芬不能在第14天后提供持续的改善。这一发现与之前的研究不同。在以前的研究中，卡洛芬的持续改善时长可达到84天11。这可能是由于不同地理区域的结果测量、治疗时间、种群特征或犬类宠物管理方面的差异导致。还有一种可能是，与目前只有三项评分的研究相比，早期研究中使用的11项结果评分增加了不正确结论的可能性10。

综上所述，本研究通过跛行评分判定，在治疗14天后，犬用4CYTE的治疗效果优于或等同于卡洛芬。此外，本研究还提供了进一步证据，表明该产品从治疗至第28天会持续发挥作用，改善关节炎症状。这种持续改善的潜力值得进一步研究。

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