农业农村部公告第801号：清瘟败毒片中非法添加三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）检查方法

2024年6月17日

附件：

清瘟败毒片中非法添加三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）检查方法 

1 适用范围

1.1 本方法适用于清瘟败毒片中非法添加三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）的检查。

1.2 用于其他兽药制剂中非法添加三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）检查时，需进行空白试验和检测限测定。

2 检查方法

照高效液相色谱法（《中国兽药典》二部附录0512）测定。

色谱条件与系统适用性试验  用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Thermo Hypersil Gold C18（100mm×2.1mm，1.9 μm或效能相似的色谱柱）；以甲醇-50 mmol/L甲酸铵溶液（20:80）为流动相，流速为每分钟0.3 ml；柱温为30℃；二极管阵列检测器，采集波长范围为200~400 nm，分辨率为1.2 nm，记录246 nm波长处的色谱图。供试品溶液中三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）色谱峰与相邻色谱峰的分离度应符合要求。

测定法  取供试品10片，研细，称取1.0 g，置50 ml离心管中，加提取液[0.1 mol/L盐酸溶液-乙腈（1:1）]20 ml，涡旋混匀，振摇20 分钟，离心（每分钟9000转）5 分钟；取上清液1.0 ml，置100 ml量瓶中，用0.1%甲酸溶液稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液。另取三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）对照品适量，用0.1%甲酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含10 μg的溶液，作为对照品溶液。取供试品溶液和对照品溶液各5 µl，分别注入液相色谱仪，同时记录色谱图和光谱图。必要时，可调整供试品溶液或对照品溶液的浓度，使两者峰面积接近。通过与对照品溶液色谱图保留时间、光谱图的对比，确定供试品中是否含有三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）。

3 结果判定

3.1供试品溶液色谱图中如出现与三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）对照品色谱图中保留时间一致的色谱峰（差异不大于±5%），且为单一物质峰；在规定的采集波长范围内，两者紫外光谱图匹配，且最大吸收波长一致（差异不大于±2nm），判定为检出三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）。

3.2 供试品溶液色谱图中峰保留时间与三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）相同，但峰面积小于检测限峰面积，判定为未检出三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）。

4 检测限

本方法检测限为0.4 g/kg。　　

附

1.三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）

C12H13N5O4      291.26

(2R,3R,4S,5R)-2-(4-氨基吡咯并[2,1-f][1，2，4]三嗪-7-基)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-甲腈　 

2.三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）对照品色谱图　 

3.三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）对照品光谱图