听课笔记 | 顾小雪研究员：《动物疫病检测用标准样品的研制及应用》——第十一届中国兽医大会实验室检测专场

中国动物疫病预防控制中心(农业农村部居宰技术中心)、国家/WOAH猪繁殖与呼吸综合征参考实验室顾小雪研究员从参考物质基本概念和分类、标准样品的研制技术、标准样品在动物疫病检测中的应用三个方面进行了分享。

（一）参考物质基本概念

参考物质：又称标准物质、标准样品，用作参照对象的具有规定特性、足够均匀和稳定的物质，其已被证实符合测量或标称特性检查的预期用途。

标准物质：具有足够均匀和稳定的特定特性的物质，其特性已被证实适用于测量中或标称特性检查中的预期用途。

标准样品：一种或多种规定特性足够均匀且稳定的材料，已被确定其符合测最过程的预期用途。

关键词：特性(可以是定量的或是定性的)、均匀、稳定

（二）有证参考物质的分类

从管理机构、组织审查机构、申报流程、参照文件、代号等方面讲解了国家标准物质、国家标准样品及兽药标准物质的区别。

国家标准物质是计量标准，可以作为计量的传递，用于校正仪器、评价测量方法、确定物样的量值；只要适宜可以代替标准样品在制定，实施标准中使用。

国家标准样品是为了实施和制定标准的需要而研制的，一般只在标准涉及的范围内使用，它是一种实物标准(相对于文字标准而言)。

兽药标准物质是为了评价检测技术控制质量或给供试兽药赋值。

（三）动物疫病检测用参考物质的分类

质量控制样品(质控品)，用于测量质量控制的标准样品，包含了核酸或血清学检测和病毒或细菌分离鉴定。

（四）动物疫病检测用标准样品的常见分类

按实际用途分：核酸类标准样品、抗体类标准样品、抗原类标准样品。 

中国动物疫病预防控制中心，近年来获得国家标准样品证书14项，其中核酸类8种、抗原类1种、抗体类4种、兽药类1种。

标准样品研制技术路线：原料的确定与鉴定、建立关键检测技术并经过方法验证、标准样品的制备、均匀性和稳定性检验、定值。

标准样品的均匀性和稳定性检验

均匀性评估：核酸分型定性标准祥品采用荧光定RT-PCR方法进行检测；阳性血清定性标准样品采用间接ELISA方法进行检测。

稳定性评估：包括短期稳定性(模批运输状态)、长期稳定性和冻融稳定性。短期稳定性和冻融稳定性采用t检验，长期稳定性采用直线拟合法进行评估。

标准样品的定值

标准值：赋予标准样品特性的值，其具有不确定度和计量溯源性陈述，并在标准样品证书中标明。

特性值：表示标准样品的物理、化学或生物所对应特性量的值。

信息值：标准样品的量或特性的值，其仅用于提供信息。(信息值不能作为计量溯源链的参考标准)

（一）在动物疫病检测中的应用问题

一是找不到：有证标准样品/标准物质种类少，有证标准物质覆盖动物疫病病种不全，总覆盖率仅为13%，其中血清类标物较核酸类标物更少。有证标物产学研脱节，产业链不健全，转化产品少，购买渠道少。

       二是不会用：标物在实验室动物疫病检测质控中不应用或应用范围局限，有63%的实验室未获得标准物质；没有技术指导文件。

（二）标准样品的应用 

从标准值(特性值、信息值)的偏倚、最低检测限、重复性、荧光PCR性能、分析特异性及诊断敏感性和诊断特异性等方面对人员能力监控、设备管理（期间核查）、方法验证和确认、试剂耗材验收、检测过程质量控制和能力比对等六大案例中标准样品进行评价。研制的标准样品已用于全国兽医实验室检测能力比对。

最后，顾小雪研究员进行了总结：
       标准样品的核心要素是有特性(可以是定量的或是定性的，如果是定的则有不确定度)、均匀、稳定、溯源性。
       标准样品在动物疫病检测质控中可应用范围十分广泛，如人机料法环的检测体系性能验证/检测过程的质控，可帮助查找检测体系中的系统误差和随机误差，是做好质量控制的关键工具。
       与医学检验相比，标准样品在动物疫病检测质量控制中的应用处于起步阶段，标准样品数量少且覆盖动物疫病病种不全，购买渠道少，实验室对应用标准样品开展质控的认知不足，也没有相关的技术指导文件，具有较大的进步空间。

笔记撰写：达剑森(扬州市邗江区动物疫病预防控制中心)