从“心”出发，NT-proBNP用于犬心力衰竭临床筛查和评估的最新研究

BNP又称脑钠肽，是当心室在压力负荷增加和容量负荷增加时，由心室壁释放的一种激素。其作用是抑制血管平滑肌细胞和成纤维细胞增殖作用，平衡机体水钠代谢和维持血压。在人类医学NT-proBNP 是判断心衰的一个生物标志物，尤其是心力衰竭发作时，是鉴别呼吸困难症状是否为心力衰竭引起的一个指标。

实验材料与方法

从2021年8月至2022年1月，在北京美联众合动物医院转诊中心的临床病例中，对有咳嗽或呼吸频率增快的呼吸道症状患犬，进行胸部x线片检查和超声心动图检查（Philips CX50 Ultrasound，荷兰），超声心动检查由经验丰富的心脏科医师通过二维 (2D)、M型、彩色血流和频谱多普勒超声心动图进行评估。

检查后随机选择充血性心力衰竭组（CHF组）患犬14只和非充血性心力衰竭组（非CHF组）14只。CHF组包括根据2019年ACVIM发表的慢性二尖瓣疾病粘液瘤样病变（MMVD）的共识指南，诊断为MMVD的C期和D期的患犬，也包括其它类型心脏病且有心源性肺水肿表现的患犬；非CHF组包括非心脏病患犬和MMVD B1和B2期患犬。

对此28只患犬使用自动血细胞计数器（IDEXX ProCyte Dx Hematology Analyzer）和自动生化分析仪（IDEXX Catalyst Dx Chemistry Analyzer）对患犬进行血常规、C反应蛋白、和血液肾功能生化指标的检查；非CHF组1只患犬因血液CRE过高被排出除外，剩余27只犬分别使用 Vcheck Canine NT-proBNP 试剂盒和（或）Vcheck Canine TnI 试剂盒（Bionote，韩国）检测NT-proBNP 和（或）肌钙蛋白I（cTnI）浓度，进行数据分析。

统计方法：

对连续变量进行目视检查，并通过 Shapiro-Wilk 正态性检验正态性。描述性统计包括分类变量的频率，以及连续变量的中位数和范围或均值和标准差。根据是否正态分布，分别使用 Wilcoxon 检验或 Welch 双样本t检验比较两组组数据（CHF 与非 CHF）。使用 R Statistical Software (v4.1.1; R Core Team 2021) 进行统计分析，P<0.05为差异显著。

实验结果

本研究共纳入27 只犬，两组在性别、体重、心率和 CRP 浓度方面无显著差异（表 1）。

然而，NT-proBNP 和TnI浓度差异显著，非 CHF 组的 NT-proBNP 浓度（图 1、2）中位数为 914.3 pmol/L（范围 500-3,519 pmol/L，n=9），显著低于（P<0.05）CHF 组（中位数 4,684.8 pmol/L，范围 500–8,416.2 pmol/L，n=11）。

图 1 ：27 只犬的 NT-proBNP 浓度的散点图。CHF组（n=11,平均4,253.94pmpl/L）的 NT-proBNP 浓度显著高于非CHF组（n=9,平均1,582.5pmpl/LP<0.05）。

图 2：  27 只犬的 NT-proBNP 浓度的箱线图。CHF组（n=11，中位数4,684.8pmol/L）的 NT-proBNP 浓度显著高于非CHF组（n=9,中位数914.3pmol/L; P<0.05）。

非 CHF 组的肌钙蛋白I浓度（图 3、4）中位数为0.08 ng/ml（范围 0.01-0.16 ng/ml，n=6），显著低于（P<0.05）CHF 组（中位数 0.28 ng/ml，范围 0.10-0.64 ng/ml，n=5）。

图 3： 11 只犬的肌钙蛋白I浓度的散点图。CHF组 (n=5,中位数0.17ng/ml) 的心肌肌钙蛋白I浓度显著高于非CHF组 (n=6; 中位数0.06ng/ml; P<0.05)。 

图 4：11 只犬的肌钙蛋白I浓度的箱线图。CHF组 (n=5) 的心肌肌钙蛋白I浓度显著高于非CHF组 (n=6; P<0.05) 。

讨论

本试验的数据来自28只临床中有呼吸症状的患犬，为了避免肾功能异常对NT-proBNP代谢的影像，淘汰了1只肾功能异常的非CHF组患犬。27只犬经过体格检查、血液学、影像学检查（胸部X线片、超声心动检查）区分出14只因心力衰竭引起呼吸症状犬和13只其他原因疾病引起呼吸症状的犬，其血清 NT-proBNP浓度中值分别为4,684.8pmol/L（500–8,416.2 pmol/L, n=11）和914.3pmol/L (500–3,519 pmol/L, n=9)，两组间显著差异(P<0.05)。结论基本与之前的研究相一致。

说明了心脏病发展为心力衰竭也是心内压升高的过程，血液NT-proBNP浓度值也是鉴别诊断心力衰竭导致呼吸急促的辅助方法之一。试验的局限是数据跨度较大，没有对心脏病进行进一步的疾病分类和心力衰竭分期比较。

国际上关于犬NT-proBNP的最新研究结果，是一篇发表在Veterinary clinical pathology（兽医临床病理）期刊的论文。 论文地址：DOI: 10.1111/vcp.13101

实验对象及方法

采集81份心脏病犬的血清或血浆样本，225份健康犬的血清或血浆样本，分别用Vcheck（ Bionote，韩国） 试纸检测犬NT-proBNP浓度，同时送往美国某大型实验室检测，并记录和分析检测结果。

根据血液保存和运输条件的不同，部分样本为采集的新鲜血液即刻检测，部分样本常温保存一定时间后检测，部分样本冷冻运输后检测等等。

实验结果

将样本冷藏于4℃条件下14小时后检测，犬NT-proBNP浓度下降了约20%；继续常温放置过夜之后，犬NT-proBNP浓度至少下降了约50%。

在符合严格运输条件的情况下，医院使用Vcheck （Bionote，韩国）检测出的犬NT-proBNP浓度与送往大型实验室后检测出的结果高度一致，一致性达到90%。

在一般的冷藏条件运输时，送往实验室后检测出的结果比在医院使用Vcheck检测出的犬NT-proBNP浓度低出许多，影响到临床结果的判读。

实验结论

1. Vcheck NT-proBNP提供在分析学上充分可以接受的结果。

2. 宠物医院的即刻检测可以很大限度减少分析前误差并确保临床结果的有效性。

3. 样本应采集后立即离心并在2小时内使用。

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