感谢以下教授、专家们的研究工作!
宠物犬血清新型冠状病毒(SARS-CoV-2)抗体的检测报告
----针对多地犬的血清检测结果看新冠病毒是否感染犬
林德贵
中国农业大学动物医学院,中国畜牧兽医学会小动物医学分会
邓均华
洛阳普泰生物技术有限公司
田克恭
国家兽用药品工程技术研究中心
蒋书东
合肥天红动物医院
张润
深圳维特动物医院
霍家奇
武汉芭比堂动物医院
采用双抗原夹心ELISA反应原理,酶标板上包被SARS-CoV-2重组蛋白S1抗原,待检样品中的SARS-CoV-2特异性抗体与包被的重组蛋白S1抗原结合,加入含HRP标记SARS-CoV-2重组蛋白S1抗原的酶标试剂进行温育。当样品中存在SARS-CoV-2抗体时,不管是IgM还是IgG抗体,都将形成“包被抗原-抗体-酶标抗原”复合物,复合物上连接的HRP催化显色剂反应,生成蓝色产物,终止反应后变为黄色。若样品中无SARS-CoV-2抗体,则不显色。
临床血清
深圳维特宠物医院犬血清8份,安徽某宠物医院犬血清9份,武汉某宠物医院犬血清6份,海口某宠物医院4份。
02
阳性血清
SARS-CoV-2重组蛋白S1抗原免疫犬血清,编号001,国家兽用药品工程技术研究中心提供。
03
试剂盒
新型冠状病毒(SARS-CoV-2)双抗原夹心ELISA抗体检测试剂盒,批号:E22A2003S,洛阳普泰生物技术有限公司研发生产。
按照试剂盒说明书对不同来源的犬血清分别进行检测。
02
试剂盒结果计算方法
临界值(CUTOFF)计算:临界值=0.16+阴性对照孔OD值均值(阴性对照孔OD值均值低于0.03者以0.03计算)。
03
试剂盒结果判定
样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为SARS-CoV-2抗体阳性;样品OD值<临界值(CUTOFF)者为SARS-CoV-2抗体阴性。
试剂盒检测SARS-CoV-2重组蛋白S1抗原免疫犬血清为阳性,27份临床犬血清均为阴性,详见附表1。结果表明,不论是在新冠肺炎疫情最为严重的武汉,还是安徽、深圳、海口等疫情轻微的省份,宠物犬均未发生新冠病毒感染。