核酸、抗原、抗体检测有何区别？

2021-02-06 2773 返回列表

由于新冠病毒疫情的影响，“核酸检测”的字样已经被人们广为熟知，那怎样理解核酸检测与抗原检测的不同，与抗体检测又有何区别，下面以常提到的猫细小病毒（FPV）为例进行说明。猫瘟是由FPV引发的一种高度传染性疾病，又称为猫泛白细胞减少症，致死率较高。大多数小猫发病时呈亚临床症状，不易觉察。发病后多表现为：高烧、严重的抑郁和厌食，有些猫出现呕吐、腹泻，甚至出血性腹泻。目前临床上针对疑似感染病例，都是通过胶体金抗原检测试纸、核酸检测和抗体检测综合评估来进行确诊的。

FPV 核酸检测

以病毒独特的基因序列为检测靶标，通过荧光定量PCR扩增，使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加，每一个扩增出来的DNA序列，都可与我们预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的靶基因越多，累积的荧光信号就越强。而没有病毒的样本中，由于没有靶基因扩增，因此就检测不到荧光信号增强。

所以，核酸检测其实就是通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否有病毒核酸，如图1（a）FPV扩增曲线图，结果阳性，随着核酸的扩增，荧光信号增强达到设定阈值。若是结果阴性，扩增曲线如图1（b），无荧光信号的增强。

优点：早期筛查、灵敏度和特异性高。

缺点：对样本采集、保存、试剂和操作人员要求较高，与胶体金试纸比耗时较长。

样本类型：肛拭子

FPV 抗原检测

通过双抗夹心Elisa原理，测定病毒表面呈现的特异性的蛋白结构，原理如图2。

样本滴加在样品垫上，通过液相层析依次通过结合垫，NC膜上的检测线（T线）和质控线（C线），结合垫内含有标记的抗原特异性抗体，可以与样本中的抗原（病毒蛋白）发生结合，当样本到达检测线（T线）时，固定在这条线上的第二种抗原特异性抗体再次与抗原结合，将会呈现阳性结果。质控线（C线）包被IgG抗体，可以结合样本垫中抗体，用于判断层析过程是否顺利。

优点：便捷，快速

缺点：特异性和敏感性弱

样本类型：肛拭子

FPV 抗体检测

病毒感染后，血清特异性抗体逐渐产生，首先出现的抗体是IgM，然后出现抗体IgG。因此，IgM抗体增高提示近期急性感染，IgG抗体增高提示既往感染。

抗体检测原理如下图3，抗体检测本身也存在局限性，若机体出现类风湿因子、自身抗体等，包括药物和肿瘤等因素，易造成试验的交叉反应，出现假阳性，“窗口期”也存在假阴性的可能。

因此，血清抗体检测仅用于对病毒的补充检测，不能单独作为诊断指标。联合使用血清抗体检测与核酸检测，有助于提高疾病的检出率。

优点：便捷，快速

缺点：不可作为单独诊断指标

样本类型：血清或血浆

结束语：以上是核酸、抗原、抗体检测的原理介绍以及优缺点分析，各位临床医生可以依据病例实际情况选择适合的检测方法并做出客观分析。

下表是核酸与IgM、IgG抗体联合检测的结果解读，在临床诊断分析中具有重要的参考价值。

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